结晶实验
生物分子结构核心的结晶实验室组件-诺曼位于皇冠体育大学诺曼皇冠体育研究校区斯蒂芬森生命科学皇冠体育研究中心2750室。该实验室的目的是帮助大学和整个皇冠体育州的皇冠体育研究人员结晶感兴趣的蛋白质和/或核酸样品。
机器人仪器由国家科学基金资助，编号0922269。
BSC-Norman通过TTP Labtech提供纳升体积的蚊子结晶筛选。蚊子使用连续卷轴的一次性正位移微移液管尖端能够分配容量范围从50 nL到1.2µL。使用一次性移液管保证没有交叉污染。目前，该设施提供大量商用96工况和48工况屏幕。有关可用屏幕，请与设施经理联系。您可以提供非商用屏幕或MCL中没有的商用屏幕。如果使用MCL不提供的筛网，您将负责填充托盘，或者，至少，96孔块，用于蚊子。如果您对使用皇冠体育app的屏幕有疑问，请联系设施经理。
设置96孔托盘所需的最小样品体积为15µL。这将允许移液100 × （50 nL-1200 nL）滴液。最佳滴度和初始筛管可与设施人员协商确定。如果有足够的纯化化合物，建议每滴使用300升样品。此外，当尝试第一次结晶样品时，应设置至少10个宽屏（=1000个条件）。
然后可以在结晶实验室或皇冠体育研究人员的家庭实验室对成功的试验进行优化。
所有的晶体托盘将在室温下自动成像，由我们的Formulatrix岩石成像仪1000，具有紫外成像和多荧光成像（MFI）技术，并与LCP结晶技术板兼容。结晶托盘也可以在4ºC下存储和成像，使用我们的Rigaku Americas Desktop Minstrel与Gallery 160成像系统。
BSC-Norman还可以为用户手动设置结晶试验提供指导和资料。建议只使用24孔或48孔托盘，而所有96孔托盘均使用蚊蚊进行设置。
在大分子的成功结晶后，实验室将为衍射和后续结构溶液的晶体筛选提供指导。
服务将收取相应的费用。
可用耗材包括：
- 96孔和24孔结晶盘
- 结晶试剂
- 托盘井密封材料
- 添加剂的筛选和优化
为结晶试验提供的设备：
- 移液器及其他所需玻璃器皿
- 恒温箱用于温度控制
- 用于观察和记录试验井的显微镜
样品纯度
提交结晶试验的样品应尽可能均匀和纯净，以获得最大的成功概率。所有可以获得的生化和生物物理信息都有助于预测结晶的成功。至少，一个超载的SDS-PAGE凝胶应该在正确的分子量下显示一个单一的条带。其它有助于确定纯度和均匀性的试验：
- 粒径排除色谱（SEC）
- 质谱分析
- 等电聚焦凝胶
- 氨基酸分析
- 氨基端测序
- Native-PAGE
- 超速离心法
- 动态光散射（DLS）
样品浓度
要考虑样品的另一个主要物理性质是浓度。一般的经验法则是样品浓度为10至20mg /mL。如果样品可以浓缩到更高的水平，那么建议这样做，相反，如果样品不能浓缩到那个水平，那么应该浓缩到刚好低于样品聚集或沉淀的水平。
